depc水怎么配制

depc水怎么配制

DEPC 水配制

DEPC水一般是指千分之一浓度的DEPC,在搅拌器上搅拌至完全溶解,即看不到“油珠”为止,用来处理枪头、EP管的DEPC水不需高压灭活,而用于配制DEPC酒精等试剂和用来这种RNA相关试验的DEPC水需灭火后使用。DEPC气味芳香浓烈,强挥发性,有毒,需在通风橱中操作。

配好的DEPC水放置于有盖子的容器内蔽光保存,一般枪头浸泡24小时后使用

DEPC水是用DEPC(diethypyrocarbonate,焦碳酸二乙酯)处理过并经高温高压消毒的MiliQ纯水。经检测不含 RNase、DNase和proteinase。DEPC水可以用于RNA沉淀的溶解,含有RNA的各种反应体系如反转录、siRNA的退火等,以及其它各种要求无RNase、DNase和proteinase的反应体系。

1、用去离子水配制0.1%的DEPC,避光

2、将枪头和EP管放入0.1%的DEPC内,保证枪头和EP管内都充满0.1%的DEPC(看自己的操作习惯了,本人是用左手拿住镊子夹住枪头或者EP管,右手使用移液器吸取0.1%的DEPC,将枪头或者EP管内充满0.1%的DEPC)

3、避光、静置、过夜

4、装枪头和EP管的盒子不需要用DEPC浸泡,将枪头或者EP管内的DEPC水大致去除干净后,装起,包好

5、121摄氏度,30min

6、180摄氏度,干燥数个钟头(三个左右吧,这个时间具体记得不是很清楚了),用前拿出来

注意:处理DEPC时需要戴乳胶手套、口罩!